冰箱细菌显微镜-冰箱细菌进化电影叫什么名字

根据营养学实验调查所得知，各家庭 所秉持的唯一习惯为将吃不完的馒头放入冰箱，通过二次加热再次饮食， 针对于馒头在冰箱中储存超过三天是否会滋生黄曲霉这一致癌物质的说法也是百口不一， 通过本篇文章一起来了解一下食物质量安全知识吧！

01

什么是黄曲霉毒素？

针对于黄曲霉毒素 这一有害物质世界卫生组织在1993年列为一级致癌物质之一 ，通过一定的显微镜成分提取分析表明，其95.5%的概率为细胞分裂层霉菌毒素， 有害性质仅次于肉毒毒素致癌物质。

机体依靠肝脏部位完成排毒解毒过程， 在短时间之内一次性摄入过多的毒素是易引发急性中毒问题 ，肝脏表皮部位在短时间之内出现了病变现象，若长时间摄入气中有害物质，也导致了 慢性中毒疾病现象发生，加剧了自身患有代谢疾病的风险。

部分食物在其储存过程中 不注重存放环境间接性导致了发霉质变现象， 其滋生少量的维生素b1成分，在医学方面将此种成分作为常见的有益成分，但 如果与发霉食品中的黄曲霉毒素宜结合间间接性导致了致癌毒性相结合现象发生。

其中黄曲霉毒素生存适宜温度较为强烈，在 一定程度上紊乱了机体的酸碱平衡机制，摄入人体之后导致了大量植物性污染成分生成， 针对于肾脏部位，肝脏部位，以及脾脏部位产生了一定的损伤。

部分人认为在烹煮食物过程中，通过多加工的方法就会消灭黄曲霉毒素，但通过医学实验表明所得知 黄曲霉毒素的耐高温环境高于了270度左右，除非与水溶液相互缓解导致有机溶剂以及油脂成分融入现象才会得以消除。

02

冷冻馒头能不能吃？存放冰箱超三天会产生黄曲霉毒素？看完涨知识

针对于冷冻馒头自身黄曲霉毒素的说法，医学方面通过分组实验的方法得出一定的结论。

医学研究人员将100个馒头分为10组的方法归列为a组B组以及C组， 通过储存方式以及储存环境的不同得出一定的研究结论： 馒头在冰箱中冷冻超过了三天并没有出现一定的口感问题，所 提取的淀粉成分也未出现无菌酶污染现象， 通过再次加热时其中的水分得以流失， 柔软程度相对于馒头原始味道发生了一定的偏低比较。

针对于 馒头在冰箱中超过三天会产生黄曲霉毒素的说法有着一定的夸张性质 ，黄曲霉毒素所生存的适宜酸度保持为25 至40 之间，冰箱的气温相对于黄曲霉毒素的适宜生存条件呈现于反比现象， 因此劝告大家：并不用担心黄曲霉毒素滋生的现象发生。

馒头在冰箱中 储存的时间取决于馒头的原材料以及制作方法， 在制作完成之后，将其放入干净的容器之内再次进行储存，并不会发生发霉现象，只是在 口感味道方面产生了一定的较硬变化， 建议大家 运用用科学知识方法合理辨别问题，不要轻信谣言。

对此医生建议大家在制作馒头的过程中也要 注重储存方法以及卫生条件的保持，可以通过塑料薄膜法包裹馒头避免出现食物交叉感染现象， 在短时间之内也要尽可能的将馒头进行二次加热，避免口感较硬影响了正常的味道。

03

以下这几种食物易滋生黄曲霉毒素，要多加留心

坚果

针对于日常生活中所常吃的瓜子以及花生等坚果类食物， 一旦感觉到一丝苦味就要及时地吐掉，并且进行漱口工作 ，避免做其中自取的黄曲霉毒素摄入人体之后，影响了口腔黏膜 健康 ，再次进入消化道部位，加重了自身患有肝癌以及肾癌的风险。

芝麻酱

部分商家为了赚取一定的利益，在 挑选芝麻酱原材料时未进行二次筛查，一系列瘪芝麻以及变质的花生就会掺杂其中， 通过一定的磨练提制，导致了黄曲霉毒素的发生，间接性影响了机体 健康 状态。

久泡木耳

木耳作为一种菌类食物在食品营养学方面又有着一定的标准范围使用方法， 建议大家在泡木耳时注重时间，不要超过4~5个小时， 避免其中滋生大量的黄曲霉毒素产生了细胞真菌病变现象。

摄入人体之后 间接性影响了皮肤层组织，受到了外界毒素的影响，短时间之内细胞核出现了分裂现象， 免疫细胞基质呈现于下降状态未达到抵抗效果，间接性导致了病变现象。

04

如何避免误食黄曲霉毒素？

医学方面 表明黄曲霉毒素中毒现象其消化道部位反应最强烈 ，此类感染性有毒，菌治在射入人体之后侵染了胃黏膜部位间接性导致了胃酸大量分泌， 在短时间之内出现了恶心，呕吐，腹胀，腹泻的不适反应。

严重时也易导致抽搐性昏迷现象，建议大家在平时生活中一定要引起及时的警惕， 不要与日常的腹泻症状相混淆， 而错过最佳的治疗时间导致了细胞癌变现象影响肾脏功能以及肝脏器官排毒效果。

面对于发霉变质的食物， 也要避免采用局部切除方法再次进行食用，不要为了一时的节约而损害了机体 健康 状态， 一定要将发霉变质的水果以及食物及时的扔掉，也要 及时的清理所侵染的冰箱部位以及水果蓝部位， 避免发生细菌滋生影响全部食物状态。

结语你在平时生活中了解过黄曲霉毒素的医学知识吗？你觉得馒头在冰箱中的储存时间还有哪些注意事项？不妨在下方评论区分享一下，让更多的人受益吧。 #夏方 养生 指南#

某生物兴趣小组的同学为探究温度对霉菌生长的影响，设计了如下实验：将新鲜程度相同的馒头片，分别置于相

儿童猜谜语及答案大全

　猜谜语，是广大人民群众非常喜爱的一种益智、休闲、娱乐活动。不仅在书面上广为传播，在口语中的`流传更为广泛，几乎每个人都能说出几个甚至几十个谜语。下面是我整理的关于儿童猜谜语及答案大全，欢迎大家参考!

　1：五个兄弟，住在一起，名字不同，高矮不齐。(打一器官)

　谜底：手指

　2：一个黑孩，从不开口，要是开口，掉出舌头。(打一植物)

　谜底：瓜籽

　3：人脱衣服，它穿衣服，人脱帽子，它戴帽子。(打一生活用品)

　谜底：衣帽架

　4：屋子方方，有门没窗，屋外热烘，屋里冰霜。(打一生活用品)

　谜底：冰箱

　5：两只小口袋，天天随身带，要是少一只，就把人笑坏。(打一生活用品)

　谜底：袜子

　6：弟兄七八个，围着柱子坐，只要一分开，衣服就扯破。(打一生蔬菜)

　谜底：蒜

　7：独木造高楼，没瓦没砖头，人在水下走，水在人上流。(打一生活用品)

　谜底：雨伞

　8：身穿大皮袄，野草吃个饱，过了严冬天，献出一身毛。(打一动物)

　谜底：绵羊

　9：一个小姑娘，生在水中央，身穿粉红衫，坐在绿船上。(打一植物)

　谜底：荷花

　10：颜色白如雪，身子硬如铁，一日洗三遍，夜晚柜中歇。(打一生活用品)

　谜底：碗

　11：有面没有口，有脚没有手，虽有四只脚，自己不会走。(打一生活用品)

　谜底：桌子

　12：白嫩小宝宝，洗澡吹泡泡，洗洗身体小，再洗不见了。(打一生活用品)

　谜底：香皂

　13：身穿绿衣裳，肚里水汪汪，生的子儿多，个个黑脸膛。(打一水果)

　谜底：西瓜

　14：不怕细菌小，有它能看到，化验需要它，科研不可少。(打一工具)

　谜底：显微镜

　15：象只大蝎子，抱起似孩子，抓挠肚肠子，唱出好曲子。(打一乐器)

　谜底：琵琶

　16：是笔不能画，和电是一家，要知有无电，可去请教它。(打一工具)

　谜底：测电笔

　17：圆筒白浆糊，早晚挤一股，兄弟三十二，都说有好处。(打一生活用品)

　谜底：牙膏

　18：上不怕水，下不怕火;家家厨房，都有一个 (打一生活用品)。

　谜底：锅

　19：一个老头，不跑不走;请他睡觉，他就摇头 (打一物)。

　谜底：不倒翁

　20：大姐用针不用线，二姐用线不用针，三姐点灯不干活，四姐做活不点灯。(打四种动物)

　谜底：蜜蜂，蜘蛛，萤火虫，纺织娘

　21：驼背公公，力大无穷;爱驮什么 车水马龙(打一物)。

　谜底：桥

　22：头戴红帽子，身披五彩衣，从来不唱戏，喜欢吊嗓子(打一动物)。

　谜底：公鸡

　23：先修十字街，在修月花台，身子不用动，口粮自动来(打一动物)。

　谜底：蜘蛛

　24：有头没有颈，身上冷冰冰，有翅不能飞，无脚也能行(打一动物)。

　谜底：鱼

　25：身披花棉袄，唱歌呱呱叫，田里捉害虫，丰收立功劳(打一动物)。

　谜底：青蛙

　26：大姐长的真漂亮， 身穿桔红花衣裳。七颗黑星上面镶， 爱吃蚜虫饱肚肠。二妹最爱嗡嗡唱，百花园里忙又忙。后腿携带花粉筐， 装满食品喂儿郎。 三姐身披黄衣裳， 腰儿细来腿儿长。飞到田间捉害虫， 尾巴毒针塞刀枪。 (打三益虫) 。

　谜底：瓢虫，蜜蜂，黄蜂(马蜂)

　27：头小颈长四脚短，硬壳壳里把身安，别看胆小又怕事，要论寿命大无边。(打一动物)。

　谜底：龟

　28：一物长来真奇怪，肚皮下面长口袋，孩子袋里吃和睡，跑得不快跳得快。(打一动物)。

　谜底：袋鼠

　29：耳朵像蒲扇，身子像小山，鼻子长又长，帮人把活干。 (打一动物)。

　谜底：大象

　30：八只脚，抬面鼓，两把剪刀鼓前舞，生来横行又霸道，嘴里常把泡沫吐。(打一动物)。

　谜底：螃蟹

;

细菌学检验有哪些方面的应用？

（1）对照实验：在探究某种条件对研究对象的影响时，对研究对象进行的除了该条件不同以外，其他条件都相同的实验．根据变量设置一组对照实验，使实验结果具有说服力．一般来说，对实验变量进行处理的，就是实验组．没有处理是的就是对照组．分析表中的内容可知，A与B是一组对照试验，A与B的对照实验中不同的唯一变量是温度（A组放在25℃的环境中，B组放在冰箱冷藏室中（2℃））．A是实验组，B是对照组．

（2）通过A与B的对照实验，分析实验结果，放在25℃环境下的馒头片发霉，而放在冰箱的冷藏室里的馒头片不发霉，得出的结论应该是：霉菌的生活受到温度的影响（或低温会抑制霉菌的生长或其他合理答案）

（3）图中的生物是青霉，其孢子呈放射状，属于真菌．真菌和细菌都有独立生活能力，细菌的基本结构有细胞壁、细胞膜、细胞质和DNA集中的区域，没有成形的细胞核，没有叶绿体；真菌的基本结构有细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核，没有叶绿体．因此霉菌与细菌在细胞结构上的区别是霉菌有成形细胞核，而细菌没有成形的细胞核．

（4）人体具有免疫功能，能识别自己和非己成分，青霉素是非己成分，相当于抗原，进入人体后，引起人体产生了免疫反应，所以注射青霉素前一定要进行皮试．否则会发生严重的过敏反应．疫苗进入人体后会刺激淋巴细胞产生一种抵抗该病原体的特殊蛋白质，叫做抗体，抗体能够协助吞噬细胞来消灭特定的病原体，这种免疫类型只对特定病原体起作用，属于特异性免疫．

（5）霉菌是多细胞的真菌，个体小，需借助显微镜观察，我们看到的馒头上的霉菌不是单个的霉菌个体，而是霉菌的菌落．

故答案为：（1）温度．

（2）温度对霉菌的生殖有影响（其它合理答案均可）．

（3）成形的细胞核．

（4）特异性．

（5）个体．

谜底是冰箱的谜语

来源：临床检验医学

近年来，随着恶性肿瘤的高发、艾滋病的流行、化疗药物、广谱抗生素、糖皮质激素和免疫抑制剂等药物的广泛使用，以及人工导管等侵入性操作、器官移植等有创诊疗技术的应用，由真菌所引起的感染日益成为临床各科室面临的巨大挑战。

为了提高临床诊断水平，加强真菌的检验能力显得至关重要，现在临床微生物实验室有关真菌检验的常见问题汇总如下，供大家学习参考。

1、为什么培养要设定35℃？

实验室通常将孵箱温度设定为35℃，是为了防止温度的波动对细菌或真菌生长的影响。临床常见细菌的最适生长温度为33~37℃(嗜热，嗜中温菌除外，占少数)，设定为35℃时上下波动2℃对培养无影响，如设定为37℃C显然就不合适了。至于真菌培养,要视标本来源而定。

一般怀疑浅部真菌感染的标本如皮屑、甲屑、头屑及毛发等分离培养于26~28℃。来源于人体深部组织的标本如痰、胸腹水、血及骨髓深部脓肿等,建议放35℃培养,是刚离体的标本在35℃更接近于人体温度,其次临床最常见的白念珠菌在35℃能形成更为典型的伪足样菌落,这与血清出芽试验在35℃做是同样的道理。

同时,来源于35℃初分离的光滑念珠菌具有更高的酶活性。怀疑温度型双相真菌感染或个别真菌需要较高温度生长时则需要两种温度同时培养。还要注意培养环境的湿度,一般要求大于60%,如果培养箱的湿度不够,最好在平板附近放置盛有无菌水的容器以保证湿度。

2、CO2对真菌生长影响大吗?

真菌属于异养型微生物，主要从有机化合物中获得碳源,而自养型微生物才需要从CO2中获得碳源，所以真菌一般不需要在二氧化碳环境中培养，而且CO2对真菌的生长和繁殖均不利,但一定浓度可刺激孢子形成。

3、在血培养中培养出真菌2次，但是患儿没有临床表现，而且临床也没用抗真菌药患儿就好了，是考虑污染吗?

这种情况要判断是否为污染菌，调查采血过程是否规范、血瓶转运过程是否符合要求、针孔是否适当封口、转运箱是否受到污染等众多因素，最关键的还是患者的临床表现，如没有真菌感染的症状，要么考虑污染，要么考虑定植(可能性不大)。

4、我们基层医院实际工作中做阴道分泌物真菌培养，生化鉴定几乎做不了，很多直接报白念珠菌，这样合适吗？

这样做不合适。目前有些检验科甚至分不清酵母菌和霉菌，在阴道白带、尿液和粪便中镜检发现念珠菌后报告为“找到霉菌”。

霉菌是指丝状多细胞真菌；酵母菌是指单细胞形态的真菌，二者不可混为一谈。阴道中感染的酵母菌大多是白念珠菌，但不排除其他酵母菌。

克柔念珠菌对氟康唑和5-氟胞嘧啶天然耐药，如果遇到类似存在天然耐药的菌株，会影响后续的治疗。

5、痰标本中少量念珠菌需要在报告中体现吗?还是不报告?

标本要求和检验程序用要体现，临床医生会综合考虑。虽然白色念珠菌导致肺部真菌感染的概率很小，遇到痰标本真菌培养中分离出该真菌，还是建议报告，临床医生结合影像学结果综合考虑。

先进性痰标本直接涂片，标本质量合格的情况下，见到真、假菌丝或大量孢子，痰培养有真菌生长，还是要报给临床医生，临床医生会综合考虑的。至于是否要做药敏，可和医生沟通后决定。

①建议留样本前5%苏打水漱口；

②清晨第一口痰；

③连送3d结果是否一致。

最好和临床医生沟通一下,或平时对医生、护士进行标本采集方法的培训。报告之前,结合痰涂片镜检结果,备注标本质量信息及污染可能性。

6、请问一下：前几天遇到一个抽出的脓液标本，打到血培养中，报阳后涂片显示真菌孢子，转种后涂片，形态上圆形，墨汁染色阳性，但是没有荚膜，转种科玛嘉没有颜色，后有白色有点**，用某国产鉴定显示滑，药敏全耐。问题是:①这个结果可信不?②墨汁用的是普通汁有影响吗?③该如何改进?

墨汁染色是针对标本中怀疑隐球菌属的荚膜进行负染，特别是新生隐球菌才做的试验，对纯培养的隐球菌属不可作为鉴定试验。

(1)将之前的脓液标本做个10%KOH湿片检，寻找真菌孢子和真、假菌丝。

(2)培养结果应该是可信的，最好和临床医生沟通一下，看患者是否有症状。

(3)对某国产品牌不熟悉,鉴定结果和药敏结果不好判断

(4)按照全国操作规程配制念珠菌的鉴定生化管，用原卫生部质控真菌鉴定符合率还是很好的，可以考虑自配生化鉴定管，用质控真菌进行验证。

(5)对每批号的某国产鉴定管用质控真菌进行验证,如果结果符合,应该没问题。

(6)最好参加原卫生部微生物质控培训，无论细菌、酵母菌方面,都会帮助你提高业务水平和验证你所用的试剂质量。

(7)墨汁只要粗细均匀，颗粒越细小越好，推荐曹素功墨汁，试剂公司也有印度墨汁可采购。

7、临床常见痰标本初次检出曲霉后,流程是怎么进行下去的?

(1)痰标本初次培养出丝状真菌菌落，前提是痰标本必须是新鲜的或不能立即送检应4℃冰箱保存。

流程是接受痰标本→镜检→培养→鉴定。

在痰标本合格的情况下,先做个10%KOH湿片镜检,低倍镜寻找真菌菌丝，是透明或暗色，是否有45度分枝。

如果痰标本合格，又找到菌丝，电话联系临床，告诉医生有丝状真菌生长，怀疑是XXXX，容易的直接报告临床，难的点种沙氏琼脂平板或察氏琼脂平板，再做进步鉴定。

(2)若标本不合格或合格但标本中未见菌丝，和临床医生电话沟通，告知有真菌生长，让医生综合考虑。鉴定正常进行,并报告临床,备注不排除污染可能。

8、酵母菌同化试验为什么放28℃而不是35C?同化试验和发酵试验有何区别?为什么教科书上说凡能发酵某种糖，一定能同化该糖，同化某种糖则不一定发酵该糖?

多数酵母菌体外最适生长温度为28-30℃，故其体外试验选用此温度。通话和发酵分别指真菌的有氧呼吸和无氧酵解，前者将糖类分解为二氧化碳和水，后者将糖类分解为二氧化碳和酒精等。

其代谢首先进行的是有氧呼吸获得能量，再进一步进行无氧酵解，这由细菌和真菌的相关酶类决定。酵母菌多数为专性需氧菌，所以其试验设计多以糖同化试验为主。比如隐球酵母只能进行有氧呼吸，所以只能同化葡萄糖而不能发酵，而酿酒酵母可将粮食发酵为酒，既发酵也同化葡萄糖。

9、鉴于目前真菌培养不是很规范，如何选择培养基、温度、报告时间和方式?请讲述实验室的具体流程。

(1)培养基：沙氏葡萄糖琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂、脑心浸膏琼脂等适宜真菌生长的培养基，临床疑似酵母菌及酵母样菌感染，有条件实验室可平行接种显色培养基，推荐采用螺口管斜面培养法，标本处理后接种于培养基斜面中下部，绝大多数为需氧菌建议平行接种两管。

(2)培养条件及报告时间：深部真菌28±1℃培养7~14d，如怀疑双相真菌感染，应同时在28士1℃及35士1℃培养。

怀疑罕见真菌慢生长真菌感染或临床已用抗真菌药物时，延长观察时间至少培养4周。

如CSF宜置28℃及35℃两个温度培养至少一周；

痰/尿/粪一般35℃48h即可，如未见丝状真菌生长，则延长培养时间；

组织标本一般30℃，2~4周。

10、是否可以用科玛嘉显色培养基作为真菌初代培养基?

可作为初代培养基之一，建议另外接种沙氏培养基或酵母氮培养基(YPDA)，SDA和YPDA一般是酵母样菌的标准培养基。

11、咽拭子真菌培养有意义吗?

咽拭子培养真菌意义不大，存在定植除非患者有临床表现。

12、请问痰标本念珠菌定植率那么高，痰涂片看到比较多的孢子和假菌丝要怎么报告才比较合理?

个人觉得还是要如实报告临床医生、并将标本质量是否合格告知临床医生，至于是否感染，临床医生会根据影像学资料、患者临床表现等综合考虑的。

13、患者的手上有湿疹一样的丘疹,怀疑真菌感染,请问怎么样采样好?

对于皮损类的标本采集，需要用70%的酒精先将患处消毒处理，再使用已消毒的不锈钢刮刀或外科手术刀在皮损边缘刮取皮屑，装在无菌容器内送检。

14、我们用一次性手套装SDA平板可以吗?

一次性手套无论是PV还是乳胶，都会产生相对低氧的环境，而真菌是需氧菌会影响真菌的生长，不建议这样操作。

可以使用透气性好的胶带(静脉输液固定针头的)封闭平板，注意不要封太。

15、用的墨汁在显微镜下不是均匀的黑色背景，而是一些细小黑色颗粒，这是不是墨汁的质量不好?还有,生物安全柜、超净工作台和通风柜三者有什么区别?

墨汁本身就是一些细微小颗粒加入溶媒形成的，墨汁质量的好坏在于颗粒的大小和均一性。

一般的墨汁检测隐球菌应该能观察，它只是作为背景,荚膜不染色，为透明的，背景是黑色。

生物安全柜和超净工作台的区别在于风吹的方向：

生物安全柜的风向是先垂直向下再向柜内，经过循环通过HEPA过滤后再排出，柜内形成一个相对负压的环境；

超净工作台的风向是先向下再向外吹，保证柜内的清洁无尘，通常用来配置平板和操作一些简单的分子克隆相关实验。

通风柜是通过风机将柜内的空气排到实验室外，通常用来配置有挥发性的化学品试剂，有害气体排向室外。

16、痰涂片中看到曲霉头，有多大临床意义?毛霉有没有污染可能？或者是定值？在痰里一直检查到青霉菌,没有意义吗?

如果痰标本直接镜检发现曲霉头，那就要考虑是曲霉感染。培养可以确定是哪一种曲霉。

毛霉存在污染的可能性，空气中也可以存在，但又因其高度的侵袭性，报告需谨慎，定值的可能性很小，但操作中污染的情况还是不少的。若标本合格，湿片镜检有90度分枝及粗大、不分隔的菌丝，那就要考虑了，否则有污染可能，最好及时联系临床医生。

青霉菌是一种条件致病真菌，如果痰中直接镜检查到菌丝，培养阳性，还是考虑感染。

17、在经验积累的初期，如何得到足够的菌株，用于练习各类染色、阅片呢?

有条件的话，最好到相关医院真菌室进修学习湿片镜检、真菌鉴定，将保存的菌株分批转种后，仔细研究其菌落颜色、大小质地等变化和镜检变化，并做好笔记。或参加医学真菌专业培训班进行系统学习。

18、如何保存真菌菌株?

最好的方法就是真空干燥、低温冻存。国际菌株保藏机构都是这种方法。

(1)将生长的斜面直接放在-10℃冷冻，表皮癣菌和许多接合菌纲菌种不可用此法保存。

(2)蒸馏水保存法：将生长在马铃薯葡萄糖培养基上的成熟的菌落，刮取菌丝体、芽孢或酵母细胞或利无菌蒸馏水冲洗斜面表面，再以吸管吸取放在无菌小管中，密封阻止蒸发，置于室温保存。

(3)另一种方法为直接加无菌矿物油至霉菌生长的琼脂斜面，至少可保存半年以上。

(4)基础液体培养基中加入15%~30%甘油，将新鲜成熟菌落挑至其中，-80℃保存。

19、一般什么样的患者我们会重点去关注是否为真菌感染呢?

免疫缺陷病患者、器官移植患者、肿瘤患者、中性粒细胞减少患者患者及较长时间使用广谱抗生素的患者。

20、霉菌培养箱(28C)被污染后如何处理?培养基放进培养箱后很快长污染菌，尤其门上的密封条上也长菌了，怎么办?

断电后，甲醛熏蒸,5%苯酚(石炭酸)擦拭后停留30min后，清水擦拭，打开通风24h后再使用。

21、血培养中可能培养出哪些丝状真菌?哪些是污染?

血培养阳性的丝状真菌主要有组织胞浆菌、马尔尼菲蓝状菌、镰刀菌、念珠菌、隐球菌、毛孢子菌、赛多孢，人眼球组织(研磨后打入血培养瓶)里曾培养出紫色拟青霉。腹水打入血培养瓶培养出棕黑腐殖霉。

文献报告皮炎芽生菌、伊蒙菌、球孢子菌都可以从血培养里培养出来。

烟曲霉是污染的,有报告土曲霉的心内膜炎患者外周血培养出来土曲霉[ I Clin Microbiol.1998Nov;36(11):3347-51]。

22、呼吸科患者，男，61岁，诊断支气管肺炎，HIⅣ阴性，在合格痰内培养出马尔尼菲蓝状菌3+，可以诊断吗?有必要复检吗?

他肝脾大吗?是否有骨骼受累及?皮肤受累及?还是仅仅局限在肺部?患者有其他基础疾病吗?

建议重送标本，如果反复培养出马尔尼菲蓝状菌要警惕。痰中培养出马尔尼菲蓝状菌，应该可以认为是致病性真菌。

马尔尼菲蓝状菌和曲霉菌丝区别：

如果在直接的临床标本中(体内)，马尔尼菲蓝状菌是酵母样的孢子，而曲霉菌是分枝分隔成45度角的菌丝。

如果在体外28℃培养物马尔尼菲蓝状菌可为淡**、黄绿色，背面红色，有红色色素渗透培养基中；

而曲霉开始为白色，表面可为不同颜色的颗粒，以此区分为何种曲霉。

马尔尼菲蓝状菌可以见到帚状枝，而曲霉可以看到曲霉头。

以上内容来源：卢洪洲、钱雪琴、徐和平主编的《医学真菌检验与图解》

求收藏

求点击

求在看

请问丝状真菌的培养基都有那些？

问题一：有没有关于冰箱的谜语 1一幢漂亮小楼房，有墙有门没有窗，外面热得直淌汗，墙里个个都冻僵。

2屋子方方，有门没窗，屋外热烘，屋里冰霜。

问题二：关于冰箱的谜语 一幢漂亮小楼房，有墙有门没有窗，外面热得直淌汗，墙里个个都冻僵。

问题三：求一条谜底时冰箱的谜语 一幢漂亮小楼房，有墙有门没有窗，外面热得直淌汗，墙里个个都冻僵。

屋子方方,有门没窗,屋外热烘烘,屋里真凉爽。

问题四：电器谜语 谜语]：铁打一只船，不推不开船，飞阵蒙蒙雨，船过水就干。

[谜语提示]：打家用电器一

[谜底]：熨斗

[谜语类别]：家用电器

[谜语]：远看象车轮，近看象八卦，惯会出风头，人人都爱它。

[谜语提示]：打家用电器一

[谜底]：电风扇

[谜语类别]：家用电器

[谜语]：有只浴缸不寻常,里面圆圆外面方,洗的人儿站一边,尽往缸里扔衣裳

谜语提示]：打家用电器一

[谜底]：洗衣机

[谜语类别]：家用电器

[谜语]：一幢漂亮小楼房,有墙有门没有窗,墙外热得汗直淌,墙里个个都冻僵.

[谜底]：电冰箱

[谜语]：一只炉子好奇怪,电波传热会烧菜,不用锅子与勺铲,只须团团转瓷盘.

[谜底]：微波炉

[谜语]：兄弟仨个爱赛跑,追的追来逃的逃,从夏一直追到冬,到头还是追不到.

[谜底]：电风扇

[谜语]：一把大手枪,不把子弹装,对准脑袋瓜,枪口喷热浪.

[谜底]：电吹风

[谜语]：小小一间房，只有一扇窗，唱歌又演戏，天天翻花样。

[谜语提示]：打家用电器一

[谜底]：电视机

[谜语类别]：电器

谜语]：是笔不能画，和电是一家，要知有无电，可去请教它。

[谜语提示]：打电用品一

[谜底]：试电笔

[谜语类别]：电器

[谜语]：叫你演唱，一声不响，学你腔调，一模一样。

[谜语提示]：打家用电器一

[谜底]：录音机

[谜语类别]：电器

[谜语]：一只小铁箱，挂在墙壁上，夏天屋里好凉爽，冬天屋里暖洋洋。

[谜语提示]：打家用电器一

[谜底]：空调机

[谜语类别]：电器

[谜语]：小巧玲珑一只箱，不用点火会有光，只要短短几分钟，烧好饭菜喷喷香。

[谜语提示]：打家用电器一

[谜底]：微波炉

[谜语类别]：电器

[谜语]：一间小小房，开个小小窗，“嗒”的一声响，又说又有唱。

[谜语提示]：打家用电器一

[谜底]：收音机

[谜语类别]：电器

[谜语]：一架照相机，大得真出奇，让它照一照，照进骨头里。

[谜语提示]：打医用品一

[谜底]：爱克斯光机

[谜语类别]：电器

问题五：有关把大象关进冰箱里要几步的连环谜语完整版 首先问把大象关进冰箱需要几步，很简单，三步：打开，放进去，关上；然后问动物开会哪个动物没来，当然是大象没到，他还在冰箱里呢啊

问题六：谜语大全及谜底 001●

五个兄弟，住在一起，名字不同，高矮不齐。谜底手指

002●

一个黑孩，从不开口，要是开口，掉出舌头。谜底瓜籽

003●

人脱衣服，它穿衣服，人脱帽子，它戴帽子。谜底衣帽架

004●

屋子方方，有门没窗，屋外热烘，屋里冰霜。谜底冰箱

005●

两只小口袋，天天随身带，要是少一只，就把人笑坏。谜底袜子

006●

弟兄七八个，围着柱子坐，只要一分开，衣服就扯破。谜底蒜

007●

独木造高楼，没瓦没砖头，人在水下走，水在人上流。谜底雨伞

008●

身穿大皮袄，野草吃个饱，过了严冬天，献出一身毛。谜底绵羊

009●

一个小姑娘，生在水中央，身穿粉红衫，坐在绿船上。谜底荷花

010●

颜色白如雪，身子硬如铁，一日洗三遍，夜晚柜中歇。谜底碗

011●

有面没有口，有脚没有手，虽有四只脚，自己不会走。谜底桌子

012●

*** 小宝宝，洗澡吹泡泡，洗洗身体小，再洗不见了。谜底香皂

013●

身穿绿衣裳，肚里水汪汪，生的子儿多，个个黑脸膛。谜底西瓜

014●

不怕细菌小，有它能看到，化验需要它，科研不可少。谜底显微镜

015●

象只大蝎子，抱起似孩子，抓挠肚肠子，唱出好曲子。谜底琵琶

016●

是笔不能画，和电是一家，要知有无电，可去请教它。谜底测电笔

017●

圆筒白浆糊，早晚挤一股，兄弟三十二，都说有好处。谜底牙膏

018●

上不怕水，下不怕火；家家厨房，都有一个

(打一生活用品)

谜底锅

019●

一个老头，不跑不走；请他睡觉，他就摇头

(打一物)

谜底不倒翁

020●

大姐用针不用线，二姐用线不用针，三姐点灯不干活，四姐做活不点灯。

(打四种动物)

谜底蜜蜂，蜘蛛，萤火虫，纺织娘

021●

驼背公公，力大无穷；爱驮什么？车水马龙

(打一物)

谜底桥

022●

头戴红帽子，身披五彩衣，从来不唱戏，喜欢吊嗓子

(打一动物)

谜底公鸡

023●

先修十字街，在修月花台，身子不用动，口粮自动来

(打一动物)

谜底蜘蛛

024●

有头没有颈，身上冷冰冰，有翅不能飞，无脚也能行

(打一动物)

谜底鱼

025●

身披花棉袄，唱歌呱呱叫，田里捉害虫，丰收立功劳

(打一动物)

谜底青蛙

026●

大姐长的真漂亮，身穿桔红花衣裳。七颗黑星上面镶，爱吃蚜虫饱肚肠。二妹最爱嗡嗡唱，百花园里忙又忙。后腿携带花粉筐，装满食品喂儿郎。三姐身披黄衣裳，腰儿细来腿儿长。飞到田间捉害虫，尾巴毒针塞刀枪。

(打三益虫

谜底瓢虫，蜜蜂，黄蜂(马蜂)

027●

头小颈长四脚短，硬壳壳里把身安，别看胆小又怕事，要论寿命大无边。

(打一动物)

谜底龟

028●

一物长来真奇怪，肚皮下面长口袋，孩子袋里吃和睡，跑得不快跳得快。

(打一动物)

谜底袋鼠

029●

耳朵像蒲扇，身子像小山，鼻子长又长，帮人把活干。

(打一动物)

谜底大象

030●

八只脚，抬面鼓，两把剪刀鼓前舞，生来横行又霸道，嘴里常把泡沫吐。

(打一动物)

谜底螃蟹

031●

四蹄飞奔鬃毛抖，拉车驮货多面手，农民夸它好伙伴，骑兵爱它如战友。

(打一动物)

谜底马

032●

头像绵羊颈似鹅，不是牛马不是骡，戈壁滩上万里行，能耐渴来能忍饿。

(一动物)

谜底骆驼

033●

说它是虎它不像，金钱印在黄袄上，站在山上吼一声，吓跑猴子吓跑狼。

(一动物)

谜底......>>

问题七：大家帮忙想几个谜底是数字的谜语或者脑筋急转弯 谜底是数字的谜语有：

1.人有我大,天无我大 (一)

2. 虚心 (七)

3. 其中 (二)

4. 一来就干（十)

5. 数字虽小,却在百万之上 (一)

6. 添一笔,增百倍,减一笔,少九成. (十)

7. 两只鸟儿对头飞,一只瘦来一只肥 (八)

8. 旭日东升 (九)

9. 泰山中无人无水 (三)

10.语言不通难开口 (五)

谜底是数字的脑筋急转弯有：

1.一颗心值多少钱.答案；一亿.因为一心一意

2.10哪个数字最勤劳,哪个数字最懒惰.答案；1最懒惰,2最勤劳.因为一不做,二不休.

3.台风天气要带多少钱才能出门?答案；四千万.因为台风天气没事千万不要出门.

4.要考试了,不能看什么书?答案；百科全书(百科全输).

5.布和纸怕什么?答案；布怕一万,纸怕万一.原因：不(布)怕一万,只(纸)怕万一.

6.30-50哪个数字比熊的大便厉害!答案:40原因：事实胜于雄(熊)辩

7.有ABCD..26个字母,如果ET走后剩多少个?答案；20个.原因；AIDS(艾滋病)掉了,ET(外星人)飞走了

8.玲玲没学过算术,老师却夸她的数学是数一数二的,为什么?答案：从一数到二

9.读北京大学要多少时间?答案：一秒钟

10.一个男人加一个女人会成了什么?答案：两个人

问题八：关于谜底是 地名 的谜语！ bixueke/miyu/diming/

摘抄

01、法官进羊圈。[答案：审羊（沈阳）]

02、双喜临门。[答案：重庆]

03、崭新的国土。[答案：新疆]

04、海上绿洲。[答案：青岛]

05、风平浪静。[答案：宁波]

06、黄昏。[答案：落阳（洛阳）]

07、人山人海的聋子。[答案：万聋（万龙）]

08、萤火虫。[答案：昆明]

09、总是第一。[答案：包头]

10、十字路口放兔子。[答案：四窜（四川）]

11、崭新的国土。[答案：新疆]

12、没有夏天。[答案：零夏（宁夏）]

13、不是男人。[答案：男非（南非）]

14、旱灾严重。[答案：五旱（武汉）]

15、奥特曼老四。[答案：杰克（捷克）]

16、盼过冬。[答案：希腊]

17、只想多挣钱。[答案：意大利]

18、蒙在鼓里。[答案：内蒙鼓（内蒙古）]

19、满一星期。[答案：达周（达州）]

20、密密麻麻的线。[答案：万线（万县）]

21、橘子树。[答案：柑树（甘肃）]

22、排队拉屎。[答案：轮蹲（伦敦）]

23、儿童节。[答案：六月（纽约）]

24、别把蝌蚪弄丢了。[答案：莫失蝌（莫斯科）]

25、铁肚。[答案：硬肚（印度）]

26、食人草。[答案：草险（朝鲜）]

27、刚出生的泥巴。[答案：泥巴嫩（黎巴嫩）]

28、没有柏树。[答案：柏零（柏林）]

29、难以分开。[答案：分难（芬兰）]

30、移开炸弹。[答案：挪危（挪威）]

31、别对哥哥嬉皮笑脸。[答案：莫嬉哥（墨西哥）]

32、难以跨过。[答案：越难（越南）]

33、不是绿色的冰。[答案：非绿冰（菲律宾）]

34、战胜的可惜不是狼是蝌蚪。[答案：胜弗狼惜是蝌（圣弗朗西斯科）]

35、为你而。[答案：为你（威尼斯）]

36、皇上在山上疯了。[答案：疯皇山（凤凰山）]

37、看门狗和你一起拉屎。[答案：看陪拉（堪培拉）]

38、四把生了锈的钝刀。[答案：锈四钝（修斯敦）]

39、把四坨屎放进冰箱。[答案：四冻屎（四O四）]

40、今天反了。[答案：天今（天津）]

41、鸭子要买好的。[答案：鸭买佳（牙买加）]

42、天天睡觉。[答案：老卧（老挝）]

43、不说话的新华字典。[答案：哑典（雅典）]

44、安了新家就地震。[答案：新家破（新加坡）]

45、在沙滩上划船。[答案：划沙（华沙）]

46、乌龟打鼓。[答案：慢鼓（曼谷）]

47、高兴的马去拉不说话的山。[答案：喜马拉哑山（喜马拉雅山）]

48、家养的鸽子进兽医院。[答案：治家鸽（芝加哥）]

49、七匹狼了六匹。[答案：一狼（伊朗）]

50、乞丐拉着朋友一起讨饭。[答案：乞拉朋齐]

51、不收电费。[答案：（免电）缅甸]

52、拣起铺盖回山寨。[答案：拣铺寨（柬埔寨）]

53、两个儿子骑马。[答案：two儿骑（土耳其）]

54、蚂蚁铗了六下害了虾子。[答案：蚂六铗害虾（马六甲海峡）]

55、坟墓里不点灯。[答案：墓里黑（慕尼黑）]

56、母鹿怀孕了。[答案：鹿生宝（卢森堡）]

57、燕子雕塑。[答案：石燕（十堰）]

58、负十减三。[答案：负十三（富士山）]

59、非竖冰。[答案：横冰（横滨）]

60、木锤子猪和窝囊废马都疯了。[答案：猪木囊马疯（珠穆朗玛峰）]

61、花生炖起吃。[答案：花生炖（华盛顿）]

62、手机、学习机、......>>

问题九：谜底是红包的简单谜语，要很容易猜的 大象装冰箱（红包）

问题十：有哪些好的四句谜语 1、一个黑孩，从不开口，要是开口，掉出舌头。谜底瓜籽

2、五个兄弟，住在一起，名字不同，高矮不齐。谜底手指

3、人脱衣服，它穿衣服，人脱帽子，它戴帽子。谜底衣帽架

4、屋子方方，有门没窗，屋外热烘，屋里冰霜。谜底冰箱

5、两只小口袋，天天随身带，要是少一只，就把人笑坏。谜底袜子

6、弟兄七八个，围着柱子坐，只要一分开，衣服就扯破。谜底蒜

7、 身穿大皮袄，野草吃个饱，过了严冬天，献出一身毛。谜底绵羊

8、独木造高楼，没瓦没砖头，人在水下走，水在人上流。谜底雨伞

9、一个小姑娘，生在水中央，身穿粉红衫，坐在绿船上。谜底荷花

10、颜色白如雪，身子硬如铁，一日洗三遍，夜晚柜中歇。谜底碗

11、有面没有口，有脚没有手，虽有四只脚，自己不会走。谜底桌子

12、 *** 小宝宝，洗澡吹泡泡，洗洗身体小，再洗不见了。谜底香皂

13、身穿绿衣裳，肚里水汪汪，生的子儿多，个个黑脸膛。谜底西瓜

14、不怕细菌小，有它能看到，化验需要它，科研不可少。谜底显微镜

15、是笔不能画，和电是一家，要知有无电，可去请教它。谜底测电笔

16、象只大蝎子，抱起似孩子，抓挠肚肠子，唱出好曲子。谜底琵琶

17、圆筒白浆糊，早晚挤一股，兄弟三十二，都说有好处。谜底牙膏

18、上不怕水，下不怕火；家家厨房，都有一个 (打一生活用品)。谜底锅

19、一个老头，不跑不走；请他睡觉，他就摇头 (打一物)。谜底不倒翁

20、大姐用针不用线，二姐用线不用针，三姐点灯不干活，四姐做活不点灯。(打四种动物)谜底蜜蜂，蜘蛛，萤火虫，纺织娘

21、驼背公公，力大无穷；爱驮什么 车水马龙(打一物)。谜底桥

22、头戴红帽子，身披五彩衣，从来不唱戏，喜欢吊嗓子(打一动物)。谜底公鸡

23、先修十字街，在修月花台，身子不用动，口粮自动来(打一动物)。谜底蜘蛛

24、有头没有颈，身上冷冰冰，有翅不能飞，无脚也能行(打一动物)。谜底鱼

分类: 医疗健康

问题描述:

我想做丝状真菌的常温下长期保存，想知道最常用的培养基都有那些，谢谢！

解析:

摘要：从发霉的红薯上和酸败腐烂的苹果上挑取霉变物用沙堡琼脂培养基28℃培养2-3天，分离出几个真菌菌株。将分离株重新进行平板划线分离，挑取单菌落表面的少许孢子用马铃薯葡萄糖琼脂培养基进行载片小培养，经28℃培养2—3天于低倍镜下观察，通过菌丝和孢子对分离株进行鉴定。观察到簇生在分生孢子梗的顶端的呈帚状分枝的分生孢子和有隔菌丝，可鉴定为青霉类菌；观察到分生孢子梗上呈轮状着生、具有3个分隔、弯曲的孢子，可鉴定为弯孢霉类菌；观察到单细胞的芽殖孢子，并通过进一步的酵母菌生理生化测定，可鉴定为酵母菌。

关键词：真菌；菌落；菌丝；孢子

1 前言

真菌一词来源于拉丁文的“蘑菇”，现在真菌这一名词的概念不仅包括蘑菇，而是代表着一个相当庞大的生物类群。什么是真菌呢？从生物学的观点来看，它们是一大类真核微生物，无根茎叶，不含叶绿素，不能利用无机物来制造食物，靠寄生或腐生生活，仅少数为单细胞，其余为多细胞，大多数真菌有分枝或不分枝的丝状体，能进行有性生殖和无性生殖。从形态上分为酵母菌、霉菌、担子菌。

其实，真菌并不像其看起来的这般抽象，在我们的日常生活中几乎到处都有它们的存在，我们每个人都有过接触和不同程度的感性认识。例如酿酒、制馒头用的酵母；酒曲的曲种（曲霉和根霉）；做豆腐乳的毛霉和红曲霉；发酵饲料的黑曲霉；味美可口的蘑菇、木耳、银耳、猴头；作为中药的神曲、麦角、虫草、茯苓、灵芝；此外还有食品、衣物、用具等因潮湿而发生的霉；引起农作物病害的小麦锈病等等都是真菌。

真菌与细菌的大小、形态、结构及化学组成差异很大，单细胞个体比细菌大几倍至几十倍，具有细胞壁，但不含细菌细胞壁的肽聚糖。有些真菌因环境条件的改变而改变形态，称之为真菌的两相性，如假皮疽组织胞浆菌在动物机体呈酵母菌样。而在人工培养基上呈丝状。

真菌不仅种类多，数量大，而且分布极为广泛，与人类生产与生活有着极密切的利害关系。有些菌丝可引起人与畜禽疾病，有些霉菌还产生毒素，直接或间接的危害人类健康。因此，了解真菌的培养方法，认识其形态十分重要。

近年来在真菌分类方面趋向于采用Anisworth&bi *** y的《真菌学辞典》介绍的分类系统。该系统认为真菌不属于低等植物，而是属于单独成立的真菌界，界以下分为黏菌门和真菌门。真菌门再分为鞭毛菌亚门、接合菌亚门、担子菌亚门和半知菌亚门。本研究从自然界分离到几株真菌，并用真菌分类方法对其进行了鉴定。

2 材料

2.1 病料

发了霉的红薯、酸败腐烂的苹果

2.2 培养基

2.2.1 沙堡琼脂培养基

成分：蛋白胨10克、麦芽糖40克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升

2.2.2 马铃薯葡萄糖琼脂培养基

成分：马铃薯200克、葡萄糖20克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升

2.2.3 保存琼脂培养基

成分：蛋白胨10克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升

2.3 器材

无菌室、手提式高压蒸汽灭菌锅、电炉、天平、铁架台、灭菌培养皿、锥形瓶、漏斗、试管、烧杯、胶头滴管、石蕊试纸、接种环、酒精灯、量筒、玻璃棒、纱布、滤纸、试管塞、报纸、扎绳、标签、温箱、冰箱、盖玻片、载玻片、显微镜、杜氏管

3 方法

3.1 真菌的分离培养

3.1.1 实验的准备

沙堡琼脂培养基的制备：用天平称取蛋白胨10克、麦芽糖40克、琼脂20克，用量筒量取蒸馏水1000毫升置烧杯中混匀，在电炉上加热熔化，加热过程中不断用玻璃棒搅拌，调整PH值至5.4，倒入锥形瓶中，115℃灭菌20分钟，倾注平板，冷却[1]。

无菌室、接种箱的清洁：用酒精棉球将接种箱的内部全部擦洗干净，放入试管架、酒精灯、标签、接种环、笔、火柴等实验用具放入接种箱内，密封接种箱。依次打开接种箱与无菌室的紫外灯，紫外线灭菌20分钟。

3.1.2 划线分离培养

在酒精灯火焰下进行以下操作：

（1）从发霉的红薯上和酸败腐烂的苹果上挑取霉变物用28℃培养2-3天，分离出几个真菌菌株。将分离株重新进行平板划线分离，挑取单菌落表面的少许孢子用马铃薯葡萄糖琼脂培养基进行载片小培养，经28℃培养2—3天于低倍镜下观察，通过菌丝和孢子对分离株进行鉴定。

（2）

左手持皿，用左手的拇指、食指及中指将皿盖揭开20度左右的角度（角度越小越好，以免空气中的细菌进入皿中将培养基污染）。划线前先将接种环稍稍弯曲，这样易和平皿内琼脂面平行，不致划破培养基。

（3）

右手持接种环，将上述霉变物分区划线接种于沙堡琼脂培养基平板中，划完前一个区域后将接种环在火焰上灼烧灭菌，冷却后与前一区域的最后一两条折线接触划出第二区域，依次类推，共划三到四个区域。划线中不宜过多的重复旧线，以免形成菌苔。

（4） 接种完毕，在皿底上作好日期，平皿倒扣，置28℃培养2-3天。

（5） 将分离培养得到的几个分离株用沙堡琼脂培养基重新进行平板划线分离，以得到纯的单一的菌落。

3.2 真菌的载片培养（小培养）

3.2.1 实验的准备

马铃薯葡萄糖琼脂培养基的制备：将新鲜的马铃薯洗净、去皮，（注意：发霉、变绿的不要使用。）切成薄片或蚕豆大小的方块，称取所需的重量，倒入锅内，加水1000mL煮沸半小时左右，至马铃薯酥而不烂为止，用四层纱布过滤，然后将事先称好的琼脂加到上述滤液中，用小火加热，使之慢慢融化，并用玻棒不断搅拌，以免烧焦锅底。再加入事先用温水溶化的糖溶液，用二层纱布过滤。测定pH值，用1mol/L的NaOH或HCl调至pH为5.5～6.5之间，最后加水补足至1000mL[2]。

无菌室、接种箱的清洁：同2.1.1

无菌水的制备：取5-6mL蒸馏水装入10mL小试管中，塞上棉塞，用报纸包装好，115℃高压灭菌20分钟。

3.2.2 实验的操作

取直径7cm左右的圆形滤纸一张，铺放于一个直径9cm的平皿底部，上放一个U形玻棒，其上再平放一张干净的载玻片与一张盖玻片，盖好平皿盖，进行灭菌[3]。

为防止培养过程中培养基干燥，特在滤纸上滴加无菌水3-4mL，挑取真菌孢子接入盛有灭菌水的试管中，震荡试管制成孢子悬液。用灭菌滴管吸取灭菌后熔化的固体培养基少许，滴于上述灭菌平皿内的载玻片中央，并用接种环将孢子悬液接种在培养基上，然后盖上盖玻片，用镊子轻轻压一下，最后盖上平皿盖,

即成为载片小培养[4]。

3.3 真菌的保存

3.3.1 保存琼脂培养基的制备

取蛋白胨10克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升至烧杯中混匀，在电炉上加热融化，调整PH值至5.4，分装试管，115℃灭菌20分钟，摆成斜面[5]。

无菌室及接种箱的清洁：同2.1.1

3.3.2 实验操作

将划线分离培养28℃2-3天的平板从温箱取出，放入无菌室中进行以下的操作：在无菌室中靠近酒精火焰处，从平板培养基上选取可疑菌落，用接种环轻轻刮取其表面的少许孢子，拉出接种环立即伸入斜面培养基上，勿碰及斜面和管壁，直达斜面底部从斜面底部开始划曲线，向上至斜面顶端为止，管口通过火焰灭菌，将棉塞塞好。接种完毕，接种环通过火焰灭菌后放下接种棒，最后在斜面管壁上注明日期，置28℃温箱中培养2-3天，后置4℃冰箱中保存[6]。

3.4 酵母菌的鉴定——生化试验

3.4.1 糖发酵试验

用12.5%豆芽汁配制成2%糖溶液（棉子糖为4%）分装杜氏管。测定发酵的容器以杜氏管为主，凡能发酵某种糖则在杜氏管内小管之顶部应能看到有一定量的CO2气泡[7]。具体操作：A.将豆芽汁分装杜氏小管，每管1.2ml，15磅灭菌15分钟。B.把各种糖用灭菌蒸馏水分别配成10%的糖溶液，煮沸15分钟，稍冷，用无菌吸管吸取一定糖液，分装于杜氏管，使糖浓度达到2%（棉子糖4%），即成为糖类发酵基础培养基。C.欲鉴定的新培养菌株，接种于发酵管，25-28℃培养，每天观察结果。一般观察2-3天即可，凡不发酵者或弱发酵者，可延长观察至10天，因半乳糖酶是适应酶，故观察发酵半乳糖可延长2周至1个月[8]。

3.4.2 同化碳源试验

A.菌液制备：将酵母菌制成菌悬液（1ml无菌生理盐水接入少许约一接种环的新培养的酵母菌制成悬液）。B.浇制平板：将此悬液全部倒入经溶化并冷却至45℃左右的20ml基础培养基中，倒入培养皿，使菌体在培养基中混和均匀，静止，凝固后在28℃把培养皿倒置几小时，使表面不致太湿。C.点样：然后在培养皿底部做上碳源名称的标记，分别用无菌不锈钢匙或无菌药匙，按标记加糖少许（约米粒大），如果结果不明显可于第二天再补加一次糖。D.观察：观察结果时以葡萄糖作对照，一般是25-28℃培养1-2天观察结果，凡能同化者在所加碳源的周围形成生长圈。凡生长缓慢的酵母或是在测半乳糖同化时，可适当采用液体培养法，即在含某种碳源的液体培养集中接入酵母，25-28℃培养1-2周，以含葡萄糖的液体培养基作对照，观察酵母生长情况，是否更加浑浊或形成环、岛等，必要时可延长观察查到三周[9]。

4 结果与分析

4.1 真菌的培养性状观察

4.1.1 真菌在固体培养基上的生长表现

酵母菌在固体培养基上的生长表现：酵母菌在固体培养基上菌落呈油脂状或腊脂状，表面光滑、湿润、粘稠，有的表面呈粉粒状，粗糙或皱褶，菌落边缘整齐、缺损或带丝状。菌落颜色有乳白色、**和红色等。

霉菌在固体培养基上的生长表现：将不同霉菌在固体培养基上培养2-3天，可见霉菌菌落有绒毛状、絮状、绳索状等。菌落大小依种而异，有的能扩展到整个固体培养基，有的有一定局限性（直径1-2㎝或更小），很多霉菌的孢子和菌丝能产生色素，致使菌落表面、背面甚至培养基呈现不同颜色，如**、绿色、黑色、橙色等。

4.1.2 真菌的载片培养的形态观察

酵母菌的载片小培养的形态观察：类似于细胞，多数为单细胞，一般为椭圆形、圆形或圆柱形。酵母细胞比细胞大，有些酵母与其子细胞连接形成链状，形成假菌丝。酵母菌以无丝分裂为主，主要为裂殖、芽殖。

霉菌在小培养上的生长镜检表现：菌体由许多分枝或不分枝的菌丝构成，许多菌丝交织在一起组成菌丝体。菌丝在显微镜下呈管状，多数为有隔菌丝，菌丝被分隔成多个细胞，每个细胞含一个或多个细胞核，孢子为分生孢子。

4.2 分析

4.2.1

图1 产黄青霉的菌落 图2 产黄青霉的菌丝和孢子

28℃生长速较快，1-2天长出菌落，10-12天直径为3-5㎝。初为白色，后变为蓝或灰绿色。菌落的质地呈致密绒状，菌落表面有明显的放射状沟纹，边缘为白色，菌落是成簇的菌丝体，无特殊气味，反面亮黄至暗**（结果见图1）。

显微镜下低倍观察：菌丝为有隔菌丝，菌丝被分隔成多个细胞，产生相当明确的分散的帚状枝分生孢子链，分生孢子为椭圆形（结果见图2）。

结合以上菌落形态及小培养的培养性状观察，可鉴定为产黄青霉。

4.2.2

图3 新月弯孢霉的菌落 图4 新月弯孢霉的菌丝和孢子

28℃不如青霉类生长速度快，3天长出菌落，颜色为暗灰绿色，背面为蓝黑色。菌落质地为棉絮状，菌落为成簇的菌丝体，无特殊气味（结果见图3）。

显微镜下低倍观察，菌丝分隔，多分枝，分生孢子梗直立。孢子在分生孢子梗上呈轮状着生，具3个分隔弯曲（结果见图4）。

结合以上菌落形态及小培养的培养性状观察，可鉴定为弯孢霉属的新月弯孢霉。

4.2.3

图5 酵母菌的菌落 图6 酵母菌的细胞

28℃培养3天，菌落呈乳白色，有光泽，平坦，边缘整齐，表面湿润，粘稠。菌落外观与细菌菌落相似，比细菌菌落大、厚、圆，不透明，有酒精味，易被接种针挑起（结果见图5）。

显微镜下低倍观察，生殖方式为芽殖，单细胞，呈圆形、卵圆形或腊肠形（结果见图6）。

结合以上菌落形态及小培养的培养性状观察，可初步鉴定为酵母菌。

4.3 酵母菌的生理生化测定

测定结果如下表所示：

葡萄糖 麦芽糖 半乳糖 乳糖 蔗糖 蜜二糖 D-木糖 D- *** 糖 L- *** 糖

发酵 ＋ ＋ ＋ — ＋ — \ \ \

同化 ＋ ＋ ＋ — ＋ — — — —

对于初步鉴定为啤酒酵母菌的菌落，进一步采用发酵和同化试验进行确定。由以上一系列的生理生化指标，可鉴定为啤酒酵母菌。

5 讨论

根据本论文所做实验结合本人所查阅资料，现将真菌的基本培养条件及特征，霉菌、酵母菌的繁殖方式，真菌实验研究的意义等讨论如下：

本研究以沙保为分离培养基，明确了真菌的最佳培养条件，如培养基配方为葡萄糖20g/l,琼脂10g/l;而土豆培养基在小培养时更利于孢子的形成,所以得到了比较多的菌丝和孢子量;为防止菌落连成片，小培养也应在观察到孢子后及时拍照并放入冰箱待用;在沙氏培养基中培养的时间为2-3d,在沙保培养基中培养的时间为2-3d

,在小培养中培养的时间为1-2d

,培养温度为28+1℃,该研究成本低,操作简便,高效率,对于真菌的分离鉴定和菌种库的建立具有一定的指导意义.今后需要进一步研究不同的真菌在培养基的特征性表现,以便于真菌的快速鉴定。

真菌的培养条件：真菌对营养要求不高，比较容易培养，喜酸性，最适PH为5-10；多数为嗜温菌，最适温度为22-28℃，少数致病真菌在37℃生长良好，个别真菌在0℃生长；需在高湿条件下才能生长，多数在相对湿度95%-100%条件下生长良好；真菌生长速度比细菌慢，培养数日后才形成典型菌落。

真菌菌落特征：1）霉菌菌落：由菌丝体和孢子组成，菌落比细菌和放线菌大，有的甚至布满整个培养基表面，菌落较疏松成绒毛或絮状，因霉菌的基内菌丝在培养基内生长，故其菌落不易被接种针挑起；因霉菌孢子带有各种颜色，使其菌落表面也呈现黄、绿、青、橙、黑等颜色。2）酵母菌型菌落：由单细胞的酵母菌组成。其外观与细菌相似。呈圆形，表面湿润光滑不透明，易被接种环挑起；多数菌落呈乳白色，少数为红色；长时间培养的菌落表面呈皱缩状。3）类酵母型菌落：外观与酵母菌落相似，但此菌落可向下生长，这是因为芽生孢子与母细胞连接形成的假菌丝伸入培养基内造成的，如白色念珠菌的菌落。

酵母菌以芽殖、裂殖、掷孢子方式进行繁殖。霉菌以无性繁殖（芽孢子、节孢子、厚垣孢子、孢子囊孢子、分生孢子）和有性繁殖（卵孢子、接合孢子、子囊孢子）进行繁殖。

另外，研究真菌有重要的意义，真菌这类微生物与人类的生产和生活有着密切的关系：1）真菌的工业利用：几乎遍及人类生活的各种工业部门，如食品、纺织、制革、造纸、医药、洗涤、饲料以及石油发酵和三废利用等，但真菌也引起相应部门的产品如食品、纺织品、皮革制品、电工器材等的腐蚀霉变。2）真菌与农业生产：真菌侵入植物体引起的植物病害，往往使农作物遭受重大损失甚至颗粒无收，如小麦锈病等。真菌对植物也有其有益的作用，有些真菌与植物的根结合在一起形成菌根，结成共生和互利的复合体；同时真菌在其生长发育过程中还能分泌生长素促进植物的生长。3）真菌与医疗卫生：真菌药材历史悠久应用普遍，许多是名贵药材。如灵芝、虫草、茯苓、红曲、竹黄、神曲、猴头、木耳等约百多种，真菌对医药界做出了重要贡献。但也有少数真菌可引起人类疾病，这些病原性真菌引起浅部真菌病和深部真菌病，因此我们要加强真菌病的诊断防治。4）真菌与生物工程：近年来真菌的分子生物学研究十分活跃，如以酵母菌为主的基因工程主要用于人胰岛素和干扰素等药物的生产上，真菌在医药工业中取得的成就显示了生物工程的巨大潜力。

该论文所涉及的实验总的来说较为成功，取得了较为理想的结果，但局于本人对真菌研究经验的有限以及实验条件的不足，对真菌仅局限于基础研究，未能做到特别的深入。

6 结论

真菌对人类有利有弊，真菌正越来越受到人们的重视，研究真菌有重要意义，本论文正是基于这一点，针对个别菌种展开了一些基础性的研究。

本论文从了解和掌握真菌的基础知识入手，来进行个别真菌的培养和鉴定，通过实验了解了产黄青霉、新月弯胞霉和啤酒酵母的培养和鉴定程序，以及相应的培养特征和鉴定结果分析方法，为以后进一步开展真菌学的研究做好基础性工作。

真菌的领域未被揭露和利用的还很多，所以对它们要继续调查、研究和总结，以诊断农作物病害和人动物疾病，发展食品工业、医药工业、农业生产、医疗卫生、生物工程防治等，挖掘我国真菌资源，开发和利用有益的真菌，造福人类。

参考文献

[1] 白毓谦等.微生物实验技术，山东大学出版社，1987：459

[2] 廖万清，吴绍熙，王高松等.真菌病学，人民卫生出版社，1989：93

[3] 张卓然等.医学微生物学，科学出版社，1998：102-103

[4] 中国科学院微生物研究所等.常用与常见真菌，科学出版社，1973：251

[5] 李榆梅等.微生物学，中国医药科技出版社，1999：45

[6] 闻玉梅等.现代医学微生物学，上海医科大学出版社，1999：724

[7] Disalvo AF et al:infection caused Penicillium marneffei,Am

J Clin Path 1973：

6（10）:259

[8] Hall WJ:Penicillium endocarditis following open heart

surgery and prosthetie

valve insertion,Am Heart 1974：8（7）:501

[9] Huang SN et al:Acute disseminated penicilliosis Am J Clin

Path 1963：3（9）:167

致谢词

首先感谢四年来学校、老师、同学对我的关心和帮助。本论文的完成，有赖于多方面的帮助，感谢学校为我提供实验场所和实验材料，在此特别要感谢我的两位实习老师，感谢任慧英老师为我提供研究方向和实验设计指导，在论文的最后完成阶段更要感谢她将我所完成的实验结果拍成插入论文；感谢邹玲老师在实验中给予的帮助。另外，还要感谢与我一起实习、始终同我一起应对难题克服困难的同学。最后，再次向在我实习期间给予我关心和